產(chǎn)品介紹

ACK 紅細(xì)胞裂解液是一種利用細(xì)胞內(nèi)外存在的鹽離子濃度差而導(dǎo)致細(xì)胞膜脹破的原理，可以從人或 鼠等的血液或組織樣品中裂解并去除無細(xì)胞核紅細(xì)胞的溶液。本產(chǎn)品主要成分是氯化銨，經(jīng)無菌處理， 主要用于經(jīng)酶消化分散的組織和淋巴細(xì)胞的分離純化，以及組織細(xì)胞的蛋白與核酸提取等實(shí)驗(yàn)中的紅細(xì) 胞去除。

操作步驟

一：血液樣本處理

1. 向 1 倍體積的新鮮全血加入 3-5 倍的 ACK 紅細(xì)胞裂解液（如 1ml 新鮮全血加入 3-5ml ACK 紅細(xì)胞裂解液），輕柔渦旋 或者顛倒混勻。 

2. 冰上放置 5-10 分鐘，期間輕輕渦旋混勻兩次，紅細(xì)胞裂解后，為清亮透明的溶液。 

3. 收集細(xì)胞：4℃，400-500g 離心 5 分鐘，沉淀細(xì)胞，小心吸除上清液。

注意：如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全，可以重復(fù)上述步驟，進(jìn)行短時(shí)多次裂解。

4. 向細(xì)胞沉淀中加入 5 倍體積的 PBS、HBSS、生理鹽水或者無血清培養(yǎng)基等溶液（如開始血液為 1ml，則加入 5ml 上述溶 液），輕柔渦旋充分重懸細(xì)胞。 

5. 將上一步溶液 4℃，400-500g 離心 5 分鐘，沉淀細(xì)胞，小心并徹底吸除上清液（可重復(fù)洗滌一次，共洗滌 1-2 次）。 

6. 適量溶液重懸細(xì)胞，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如提取 RNA，建議此步開始使用 RNase-free 水配制的溶液進(jìn)行后續(xù)操作。 

一：組織細(xì)胞樣本處理

1. 新鮮組織細(xì)胞經(jīng)膠原酶或者胰酶等消化處理，分散成單個(gè)細(xì)胞懸液，離心棄除上清。 

2. 向 1 倍體積細(xì)胞沉淀加入 5-8 倍的 ACK 紅細(xì)胞裂解液（如 0.5ml 細(xì)胞沉淀體積加入 2.5-4ml ACK 紅細(xì)胞裂解液），輕柔渦旋或者顛倒混勻。 

3. 冰上放置 5-10 分鐘，期間輕輕渦旋混勻兩次，紅細(xì)胞裂解后，為清亮透明的溶液。 

4. 收集細(xì)胞：4℃，400-500g 離心 10 分鐘，沉淀細(xì)胞，小心吸除上清液。

注意：如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全，可以重復(fù)上述步驟，進(jìn)行短時(shí)多次裂解。

5. 向細(xì)胞沉淀中加入 15-20ml 的 PBS、HBSS、生理鹽水或者無血清培養(yǎng)基等溶液，輕柔渦旋充分重懸細(xì)胞。 

6. 將上一步溶液 4℃，400-500g 離心 5 分鐘，沉淀細(xì)胞，小心并徹底吸除上清液（可重復(fù)洗滌一次，共洗滌 1-2 次）。

7. 適量溶液重懸細(xì)胞，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如提取 RNA，建議此步開始使用 RNase-free 水配制的溶液進(jìn)行后續(xù)操作。 

保存條件

4℃保存，一年有效，室溫運(yùn)輸。 

注意事項(xiàng)

1. 本裂解液是無菌產(chǎn)品，分離細(xì)胞用于細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，請(qǐng)注意無菌操作

2. 本品僅限于哺乳類動(dòng)物無核紅細(xì)胞裂解（不適用于有核紅細(xì)胞，如鳥或禽類等）