產(chǎn)品介紹

NCM Stbl3 Competent Cell 是新賽美生物研發(fā)的用特殊化學(xué)方制備的 Stbl3 感受態(tài)細(xì)胞， 來源于 HB101 E. coli strain，是慢病毒載體系統(tǒng)推薦使用的菌株，可有效抑制長片段末 端重復(fù)區(qū)的重組，降低低錯(cuò)誤重組的概率。轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 108-109 菌落數(shù)/ug（質(zhì)粒 pUC19），是實(shí)現(xiàn) DNA 克隆，文庫構(gòu)建等實(shí)驗(yàn)的理想產(chǎn)品。

產(chǎn)品特色 

? 可實(shí)現(xiàn)含有重組序列等不穩(wěn)定質(zhì)粒轉(zhuǎn)化

? 效率高：可達(dá)到 108-109 cfu/ug pUC19 DNA

? 穩(wěn)定性好：-70 度冰箱可保存一年時(shí)間

Stbl3 基因型

F–mcrBmrrhsdS20(rB–,mB–)recA13supE44ara-14galK2lacY1proA2rpsL20(StrR) xyl- 5λ--leu mtl-1

操作步驟 

1. 取 100ul 冰浴上融化的 Stbl3 感受態(tài)細(xì)胞，加入目的 DNA（質(zhì)?；蛘哌B接產(chǎn)物），輕輕混 勻，在冰浴中靜置 30 分鐘。 

2. 42℃水浴中熱激 30 秒，然后快速將離心管轉(zhuǎn)移至冰浴中 2 分鐘，該過程不要振蕩離心 管。 

3. 向每個(gè)離心管中加入 900ul 無菌的 SOC 或者 LB 培養(yǎng)基（不含抗生素），輕柔地混勻后置 于 37℃，200rpm 搖床上孵育 1 小時(shí)，使細(xì)菌復(fù)蘇。

4. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求，吸取不同體積或者離心濃縮后的已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞加入含相應(yīng)抗生素 的 LB 瓊脂培養(yǎng)基上，將細(xì)胞均勻涂開，將平板置于 37℃至液體被稀釋，平板倒置，過夜 培養(yǎng)。 

保存條件 

-70℃保存，干冰運(yùn)輸，至少 6 個(gè)月有效； 

注意事項(xiàng) 

1. 剛化凍的感受態(tài)細(xì)胞效率最高，避免反復(fù)凍融； 2. 轉(zhuǎn)化整個(gè)過程要輕柔，避免移液器吹吸。