產(chǎn)品介紹

NcmBlot blocking buffer（快速封閉液）是一種即用型，高效快速應(yīng)用于 Western Blot 等實(shí)驗(yàn)的封閉液。封閉 時(shí)間僅需 10 分鐘，效果優(yōu)于脫脂奶粉、BSA、酪蛋白等傳統(tǒng)封閉液，獲得更高的信號(hào)，更低的背景值，信噪 比高。該試劑不含有哺乳動(dòng)物來源的蛋白成分，避免與抗體發(fā)生交叉反應(yīng)，適用于磷酸化的抗體，但不可用 于生物素標(biāo)記的抗體。 

產(chǎn)品特色 

? 即用型封閉液，無需配制 ? 封閉時(shí)間短，僅需 10 分鐘 ? 背景低，信噪比高，優(yōu)于常規(guī)奶粉等封閉的效果 ? 不含哺乳動(dòng)物來源的蛋白，適用于磷酸化的抗體 

操作步驟

1. 完成轉(zhuǎn)膜后，將膜移入到平皿或者其他適合的容器中（可以不洗滌膜）。 2. 根據(jù)膜的大小，加入適量體積的 NcmBlot Blocking Buffer 封閉液，需完全浸沒覆蓋膜，對于 7.5x 8cm 的膜推薦使用量 5-10ml。 3. 置于水平搖床上，室溫條件下振蕩孵育 10 分鐘。 4. 取出封閉完成的膜，用洗滌液沖洗蛋白膜 2-3 次，即可用于一抗孵育等后續(xù) western blot 實(shí)驗(yàn)。 

保存條件

4℃保存，冰袋運(yùn)輸，至少 1 年有效； 

注意事項(xiàng) 

1. 通常用于 PVDF 膜或 NC 膜的封閉時(shí)間為 10 分鐘。對于背景低的抗體，可以縮短到 5 分鐘，而對于一些背景 非常高的抗體，可以嘗試將封閉時(shí)間延長為 30-60 分鐘。 2. 沒有任何一種封閉液是適用于所有實(shí)驗(yàn)體系的，因此對于一些特殊的實(shí)驗(yàn)或抗體，可能需要具體情況考慮使 用其它更合適的封閉液，比如奶粉、BSA 等封閉試劑。 3. 信號(hào)弱或者無信號(hào)：有可能是上樣量不足；轉(zhuǎn)膜效率低；抗體效價(jià)低，特異性差等原因造成，需要根據(jù)實(shí)驗(yàn) 情況進(jìn)行調(diào)整 4. 背景高：有可能是抗體使用量過多；蛋白膜洗滌時(shí)間不足；抗體和封閉液發(fā)生交叉反應(yīng)；試劑或儀器設(shè)備被 污染等原因造成，需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)具體情況進(jìn)行調(diào)整。 5. 本產(chǎn)品僅限于科研使用，實(shí)驗(yàn)時(shí)請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。