產(chǎn)品介紹
RNAfollow(組織 RNA 保存液)是一種液體的,安全無(wú)毒的組織保存制劑,其可迅速滲 入到組織內(nèi),穩(wěn)定和保護(hù)細(xì)胞的 RNA 于原位,通過(guò)高效抑制 RNase 的活性而保持 RNA 的完 整性。組織樣品在RNAfollow 中保存,不會(huì)引起 RNA 的降解,可不用立即處理樣品或?qū)悠?冷凍在液氮。保存在該試劑中的樣品,可在室溫保存 1 周,或-20℃/-80℃長(zhǎng)期保存,且反復(fù) 凍融不會(huì)顯著影響 RNA 的品質(zhì)和數(shù)量。
產(chǎn)品特色
? 樣品無(wú)需液氮處理和冷凍保存
? 即時(shí) RNase (核糖核酸酶)滅活
? 最大限度減少研磨和冷凍
? 長(zhǎng)期保存且可反復(fù)凍融
? 用途廣,可保存、運(yùn)輸和郵寄等
? 與大多數(shù) RNA 分離操作兼容,結(jié)果更準(zhǔn)確
操作步驟
1. 需先估量加入 RNAfollow 中的組織重量,根據(jù)加入至少 10 倍體積組織的量來(lái)確定加入 RNAfollow 的使用量,如:組織 100mg 需加入 1ml RNAfollow。 2. 動(dòng)植物組織:切割獲得組織樣品,對(duì)于過(guò)大的組織需剪切成任何一邊的最大厚度不超過(guò) 0.5cm,完全侵入到 RNAfollow 保存液中。 培養(yǎng)的細(xì)胞、細(xì)菌和真菌等:離心收集細(xì)胞,棄去上清,將細(xì)胞等用 PBS 清洗一次,再 用少量的 PBS 重懸,然后加入 2 倍體積的 RNAfollow 溶液保存。 注:RNAfollow 只能用于新鮮組織,在浸入 RNAfollow 之前不能冷凍組織。組織樣品體 積盡量小,對(duì)于過(guò)大組織樣品要簡(jiǎn)單切碎,最大厚度不可超過(guò) 0.5cm。 3. 在 RNAfollow 中的樣品組織保存時(shí)間:在 37℃可保存 2 天;在室溫(25℃)可保存一周 時(shí)間;4℃可至少保存 1 個(gè)月;對(duì)于-20℃或-80℃長(zhǎng)期保存,先將樣本在 4℃條件下過(guò) 夜?jié)B透,再移入到-20℃或-80℃長(zhǎng)期保存。 注:RNAfollow 不會(huì)溶解或破壞組織樣品的結(jié)構(gòu),可反復(fù)凍融至少 20 次以上,不會(huì)顯 著影響 RNA 的完整性。若需長(zhǎng)途運(yùn)輸,在運(yùn)輸過(guò)程中需確保組織完全浸入在 RNAfollow中。 4. 保存在 RNAfollow 中樣品的 RNA 提取:RNAfollow 溶液可與多數(shù)的 RNA 提取方法兼容, 如常見(jiàn)的 TRIzol 或柱式 RNA 提取試劑盒。 組織:用滅菌鑷子將組織從 RNAfollow 中取出,移入到 RNA 提取試劑中(如 TRIzol),迅 速地將其勻漿,按照新鮮組織提取 RNA 的方法進(jìn)行 RNA 的提取。 細(xì)胞:從保存在 RNAfollow 中的細(xì)胞中提取 RNA,可通過(guò)離心,去除 RNAfollow 溶液, 再加入 RNA 提取試劑?;蛘撸苯酉蚣?xì)胞和 RNAfollow 混合液中加入 RNA 提取試劑, 裂解細(xì)胞,提取 RNA。 保存條件 室溫保存,運(yùn)輸,二年有效;低溫貯存可能會(huì)產(chǎn)生沉淀或析出晶體,需37℃完全 溶解后再用。 注意事項(xiàng) 1. RNAfollow 溶液只能保存新鮮組織樣品,不能用于冷凍樣品的保存。 2. 組織樣本任何一邊的最大厚度不能大于 0.5 cm, 然后將組織塊放入到 10 倍體積的 RNAfollow 中保存,要完全浸入到 RNAfollow 中。 3. 離心沉淀細(xì)胞,去除 RNAfollow,需至少 5000g 以上的離心力。 4. 植物葉片不適合用該試劑保存,因表面的臘表皮使 RNAfollow 很難完全滲入。5. 全血、血漿或血清中的 RNA 不可保存在 RNAfollow 中,因?yàn)樗鼈兊鞍缀窟^(guò)高,與 RNAfollow 混合后易形成不溶的沉淀。對(duì)于全血中白細(xì)胞的保存,要將白細(xì)胞從紅細(xì)胞 和血清中分離出來(lái),并按組織培養(yǎng)細(xì)胞一樣處理后,白細(xì)胞便能有效地保存在 RNAfollow 中。