產(chǎn)品介紹
ExpressCast PAGE彩色凝膠快速試劑盒是一種采用上層膠和下層膠的新型預(yù)混液,在傳統(tǒng)凝膠配方基礎(chǔ)上進(jìn)行了優(yōu)化,僅需加入改進(jìn)型促凝劑即可制膠,無(wú)需加TEMED,避免惡臭氣味。不僅簡(jiǎn)化和縮短凝膠配制步驟和時(shí)間,而且兼容傳統(tǒng)的Laemmli體系中的Tris-Glycine 電泳緩沖液,可以在高電壓下快速完成蛋白電泳。上層膠的緩沖液中加入了紅色指示劑,使加樣孔清晰可見(jiàn),方便加樣。
產(chǎn)品特色
? 僅需加入改進(jìn)型促凝劑即可,無(wú)需加TEMED,避免惡臭氣味
? 制備紅色的上層膠,膠孔清晰可辨,方便加樣
? 縮短凝膠電泳時(shí)間,150V條件下,40-60分鐘即可完成電泳
? 兼容傳統(tǒng)的Tris-Glycine電泳緩沖液, 穩(wěn)定性好,分辨率高,條帶更加清晰
操作步驟
(一)下層膠配制:以10%分離膠,制膠厚度1.0mm為例
1. 分別量取等體積的下層膠溶液2.5ml和下層膠緩沖液2.5ml,輕柔混勻。
2. 加入50ul改進(jìn)型促凝劑至上述混合液中,混勻。
3. 將配制好的溶液,灌入制膠板內(nèi), 加入適量的醇或水,壓平分離膠,待下層膠凝固后(5-15分鐘),棄去上層水或醇,用濾紙吸取多余的水或醇。
(二)上層膠配制
1. 分別量取等體積的上層膠溶液0.75ml和彩色上層膠緩沖液0.75ml,輕柔混勻。
注意:由于紅色顏料的理化性質(zhì),使用前請(qǐng)搖勻。
2. 加入15ul改進(jìn)型促凝劑至上述混合液中,混勻。
3. 將配制好的溶液, 灌入制膠板內(nèi),緩慢插入梳子。
4. 待上層膠凝固后(10-15分鐘),取出梳子,上樣, 在Tris-Glycine電泳緩沖液體系中, 電壓150V, 電泳40-60分鐘。
注意事項(xiàng):
1. 丙烯酰胺有神經(jīng)毒性,請(qǐng)穿戴實(shí)驗(yàn)服及口罩經(jīng)行相關(guān)的實(shí)驗(yàn),若是不小心濺到身體上,請(qǐng)及時(shí)用流水清洗,若有需要,請(qǐng)前往醫(yī)院咨詢醫(yī)生處理。
2. 本品因加入紅色顏料,上層膠對(duì)樣品沒(méi)有濃縮效果,經(jīng)過(guò)內(nèi)部成分的優(yōu)化,與傳統(tǒng)凝膠相比,對(duì)蛋白條帶分離效果更好,分辨率更高,蛋白條帶更窄更銳利。
3. 改進(jìn)型促凝劑的用量?jī)H供參考,量越多的促凝劑可加速凝膠,反之亦然;凝膠速度與溫度成顯著正相關(guān),溫度越高凝膠速度越快,溫度越低凝膠速度越慢,實(shí)際用量可根據(jù)個(gè)人實(shí)驗(yàn)習(xí)慣經(jīng)驗(yàn)及環(huán)境適當(dāng)調(diào)整。
4. 本產(chǎn)品已加入適量的TEMED替代品,如需要進(jìn)一步提高凝膠速度,灌膠前溶液中可按需補(bǔ)充適量TEMED。
5. 為避免凝膠中氣泡的形成,建議在配膠之前,使膠溶液及緩沖液平衡到室溫(如室溫放置幾分鐘)。
6. 本產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究。